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流式检测 T 细胞增殖的技巧有哪些

发布时间2019-01-10 浏览次数：830

集中于 T 细胞的许多基础和临床免疫研究包括增殖测定，都是为了确定 T 细胞是否能够在不同的体外或体内条件下增殖。流式细胞仪术是测量 T 细胞增殖的理想方法，现在有一套染色产品，可以在现有的流式细胞仪染色板中加入增殖染料。与所有流式细胞术染色步骤一样，一定要做一个预实验确定染色试剂的用量和确定采集的细胞数，在下一个 T 细胞实验确定使用其中的一个染色方案来检测细胞的增殖。

胞内荧光染色：

羧基荧光素二乙酸酯琥珀酰亚胺酯（CFSE）或类似的荧光染料是可以进入活细胞内的。在增殖期间，随着细胞分裂荧光染料的浓度也随之稀释，并且可以在流式细胞检测分析时作为离散峰测量多次细胞分裂。当您在预实验中检测这些染料时，需确保这些增殖染料不影响细胞活性或形态。

DNA 合成：

细胞增殖还可以通过胸苷合成类似物 5-溴-2＇-脱氧尿苷（BrdU）检测细胞周期 S 期的 DNA 合成量来测定。通常在细胞培养中添加 BrdU 以确定体外增殖，并且使用抗 BrdU 的二抗与细胞内因子结合来测量 BrdU 掺入。

以上 T 细胞增殖方法的可能有一种更适合您正在进行的实验，或者可用于您的流式细胞仪。每种方法都相对容易应用到您的下一个实验，并可以根据该检测更好地了解细胞功能。