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无外泌体血清制备操作步骤!

发布时间2020-10-20        浏览次数:1212

以外泌体为代表的细胞外囊泡是近几年研究的热点,目前的外泌体研究主要通过研究体外培养细胞来源的外泌体,分析其在体内外的功能作用。一般的血清FBS中含有供体细胞自然分泌的大量Exosomes,而用于Exosome研究的细胞必须提前geng换无外泌体的血清进行培养,以减少对后续实验结果的污染。

目前市面上存在着商业化的无外泌体血清,然而由于其价格较高等因素,很多研究者选择自己制备无外泌体血清,而常用的主要是基于超速离心的无外泌体血清分离方法

无外泌体血清制备步骤:

1. 根据需要处理的血清体积选择合适的转子与超离管。

2. 在超净工作台,将普通血清置于超离管中,配平后,进行热封口。

3. 将封口后的超离管放于离心机转子中,并加入相应适配器然后拧紧转头盖。

4. 设置离心程序:4℃,120,000 ×g,离心18小时(也有研究者选择100,000 ×g离心18小时【2】)。

5. 离心结束后,回收上清液,为避免污染,在超净工作台操作。

6. 收集得到无外泌体血清,并储存于-20℃中备用。

无外泌体血清产品特点:

1、专为外泌体研究而设计;

2、无菌采集的健康胎牛血清过滤法去除外泌体;

3、胎牛血清内源外泌体去除率达97%;

4、过滤法可有效保护FBS中重要的细胞营养因子;

5、培养的细胞生长速率与形态与普通FBS无差异。

无外泌体血清是一种可由多种细胞分泌的直径为30-150nm的膜性小囊泡。经研究后发现,无外泌体血清其内含有独特的蛋白质与核酸分子,无外泌体血清所含成份与其细胞来源密切相关,这也决定了无外泌体血清的功能特异性,如抗原提呈、信号传导或诱导抗肿瘤免疫反应、细胞迁移、细胞分化、细胞间通信、肿瘤转移等。目前,无外泌体血清研究已经成为临床诊断与基础医生的新热点。

无外泌体血清关注市场的动向,才可以geng好的服务市场,在不断的挑战中,追寻梦想,实现自己的价值。无外泌体血清发挥了自己的实力,挑战自己,追求的道路上,无外泌体血清geng多的是坚持不懈的努力,奋发向上的积极。无外泌体血清简便可靠。专业化知识强,让无外泌体血清的努力geng好的得到了展现,也是在新的时代里,无外泌体血清的付出是值得称赞的