如何正确保存抗体？

抗体由于性质和所使用的储存条件等各有不同，其保质期可能从几周到几年。抗体能否正确保存，直接决定了抗体的活性和使用效果。每个抗体有其独特的保存佳条件，但我们依然可以总结抗体保存的一般准则以及一些注意事项。抗体必须存放在适当的温度和pH值范围。为了维持蛋白质的活性，以及防止其聚集，经常保存在一定浓度的甘油，蔗糖，或类似的物质里面。如果抗体保存得当，大部分抗体活性都可以维持数月甚至数年。

图1  抗体示意图1. 抗体保存要点
（1）收到抗体后需先在 12000 rpm 离心 1-5 分钟，再打开管盖进行分装和保存，如果抗体体积不足50 ul，可延长离心时间至 5 分钟，从而确保抗体全部离心下来。
（2）对于大部分抗体，比较合适的保存方式是分装后保存在-20℃或-80℃，也可4℃短暂保存1-2周，并不影响抗体活性。
①对绝大多数抗体来说，保存在-20℃即可。如果抗体在2周内会使用，推荐在4℃保存，这是为了避免反复冻融对抗体活性的损害。如果要长期保存则好是在-20℃或-80℃。当然关键的是按照说明书的推荐来进行保存。但是，腹水形式的产品收到后需立即冻存，因为该类产品含有大量的蛋白酶，长期在4℃保存会导致抗体的降解。
②分装可以大程度的降低反复冻融对抗体活性的损害，同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体造成的污染可能性。分装的量以一次实验用完为好，少不能少于10ul每份。因为分装体积越小，抗体的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响。复融后的分装抗体如果一次用不完，需将剩余母液保存在4℃，避免再冻起来。
③抗体工作液应该当天配制当天用完，在4℃尽量不要超过1天。
④尽量将抗体保存在冰箱里层，而不是门上。且避免将抗体保存在自动除霜冰箱中。
（3）大部分抗体的运输条件：一般的运输过程需要1-2周的时间，所以是在4℃的条件下来完成的。4℃运输主要的目的是为了避免反复冻融对抗体活性的损害，如果使用干冰运输，那么收到时抗体是冻起来的，为了分装就需要解冻，这就多了一次冻融的过程。所以运输过程中避免干冰运输。

2. 抗体保存示例
(1)多克隆抗体
多克隆抗体在血清中于-20℃保存十年其活性损失不大。然而，一旦抗体被纯化后，储存在50%的甘油中于-20℃保存，即使没有冻融，其活性的损失也可以观察到，尽管其进程仍然非常缓慢。即使没有甘油，只要你不反复冻融，抗体也可以存储在-20℃几年甚至几十年。此外，该抗体浓度应高于1mg/ml，因为稀的抗体容易失去活性而且容易造成物理吸附导致的损失。
(2)单克隆抗体
单克隆抗体可以加入50％的甘油存放于-20℃。也可4℃或-20℃保存于饱和硫酸铵中。一般不会出现失活、细菌滋生以及氧化等现象。而冻干法（冷冻干燥，干燥或从冰冻状态）为一些冰冻以后不稳定抗体提供了一种替代的保存方法。在大多数情况下，冻干的抗体好是存放在-20℃。但冻干法需要昂贵的设备和劳动力。
(3)带标记的抗体
带标记的抗体一般储存在黑色容器中或者用锡箔纸包裹。
①酶标记抗体
碱性磷酸酶和其他酶结合物对于冷冻特别敏感，一般应在4°C短期存储。标记抗体长期保存好是在终浓度为50％的甘油或乙二醇中于-20°C保存。虽然某些酶结合物可在无保护剂的情况下于-20°C储存，但必须分装，以防止反复冻融。
②荧光标记抗体
荧光遇光容易分解，荧光标记的试剂（不只是抗体）必须避光保存，其应该存放在4°C，避免让其凝固。

3. 抗体保存其它相关信息：
(1)甘油保存
有些科研工作者会向抗体中加入50%的甘油来避免反复冻融，甘油在-20℃会降低冰点。这对很多抗体可能是可行的。加入甘油的溶液不建议在-80℃保存，因为这已经超过了甘油的冰点。如果需要加入甘油来保存抗体的话，请注意无菌操作，避免污染。
(2)蛋白保护剂
蛋白在高浓度时不容易降解（1 mg/ml 或者高），这就是为什么在抗体中加入 BSA 之类作为稳定剂的原因了；另一方面，加入的蛋白也可以减少抗体由于管壁吸附所造成的损失。但是如果抗体要用来标记的话，则不能加入蛋白稳定剂，因为这些稳定剂会和抗体一起竞争结合标记物。
(3)关于叠氮化钠（sodium azide）的使用
为了防止微生物污染，叠氮化钠经常被加入到抗体中（终浓度 0.02% (w/v)）。但在下述情况中不能使用叠氮化钠：
①如果抗体用于染色或处理活细胞，用于体内研究：叠氮化钠在抵抗微生物的同时，对其它大部分有机物也是有毒的，  因为它阻断了线粒体的 cytochrome electron transportsystem。
②要偶联带有氨基基团的抗体：叠氮化钠会干扰任何含有氨基基团的偶联，因此在进行偶联之前，应将叠氮化钠去除。偶联后的抗体可以加入叠氮化钠保存，但是浓度只能是0.01％。对于需要偶联的抗体，thimerosal (merthiolate)可以替代叠氮化钠作为保护剂。
此外，如果需要去除叠氮化钠，可以通过凝胶电泳或过滤的方式，IgG  的分子量是 150kDa，叠氮化钠的分子量只有65Da。使用cut off 14kDa的滤膜即可将叠氮化钠从抗体中去除。