发布时间2023-03-20 浏览次数:294
维生素C检测试剂盒(磷钼酸微板法)操作步骤
中文名:维生素C检测试剂盒(磷钼酸微板法)
规格:100T
分类:生化检测
储存条件:4℃,避光,6个月
用途:定量检测血清、血浆、组织等样品中的维生素C(抗坏血酸)含量
注意事项:维生素C被2,6-二氯酚靛酚氧化成脱氢维生素C,在酸性条件下,2,6-二氯酚靛酚呈红色,被还原后呈无色,滴定至淡红色时即为终点。
适用范围:本试剂盒仅用于科研领域,不宜用临床疑问诊断或其他用途。
维生素C检测试剂盒(磷钼酸微板法)操作步骤
维生素C检测试剂盒(磷钼酸微板法)操作步骤:
1、稀释组织匀浆液:按组织匀浆液(5×):蒸馏水稀释,获得组织匀浆液,待用。
2、制备MPA工作液:取一支MPA粉末,充分溶解于酸性缓冲液中,4℃保存3~4天有效。
3、配制系列Vitamin C标准:取干净离心管或试管,依次稀释。
4、准备样品:取待测材料如青菜,水果,松针等,清洗擦干,准确称量,加入研磨器内;加入少量1×组织匀浆液,研磨碎,留取上清,再次用1×组织匀浆液研磨,zui后一并倒入离心管,补充组织匀浆液。充分混匀后,离心;取上清液,加入等量蒸馏水,即为待测液。
5、加样:按照下表设置空白孔,标准孔,测定孔,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的Vitamin C含量过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定;样品的检测能设置2平行孔,求平均值。
6、Vitamin C测定:立即混匀,水浴,以蒸馏水(空白管)为空白对照;以酶标仪测定各标准孔,测定吸光度,以标准孔Vitamin C含量(μg)为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
维生素C检测试剂盒(磷钼酸微板法)原理:
在强酸和偏磷酸的根离子存在条件下,钼酸铵能与维生素C反应蓝色化合物,在一定浓度范围,吸光度值与浓度呈线性关系,在505nm处检测吸光度,通过检查标准曲线,获得Vitamin C含量。
维生素C检测试剂盒(磷钼酸微板法)优点:
1、反应迅速,
2、操作简便,
3、还原糖及其他常见在还原物质对实验没有干扰,因此专一性好。
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