古朵阐述：猪雌二醇(E2)ELISA试剂盒使用目的

发布时间2023-05-24        浏览次数：262

  古朵阐述：猪雌二醇(E2)ELISA试剂盒使用目的

  本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中雌二醇(E2)含量。

  实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪雌二醇(E2)水平。用纯化的猪雌二醇(E2)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入雌二醇(E2)，再与HRP标记的雌二醇(E2)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的雌二醇(E2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中猪雌二醇(E2)浓度。

  标本要求:标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

  操作步骤标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

  加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

  温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

  配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

  加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

  温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟。

  终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。

  测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

  猪雌二醇试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针