Elisa实验：间接法操作elisa试剂盒

发布时间2023-06-20        浏览次数：142

  间接法操作elisa试剂盒

  间接法可用于检测未知抗体的elisa试剂盒

  elisa试剂盒步骤如下：

  1.首先用包被缓冲液将已知抗原稀释到1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜;

  2.第二日日洗涤3次;

  3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;

  4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml;

  5.37℃孵育30-60分钟，洗涤; 后一遍用DDW洗涤。elisa试剂盒

  6.加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

  7.终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

  8.结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。elisa试剂盒

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