大鼠谷胱甘肽S转移酶P(GSTP1)ELISA KIT的应用

发布时间2023-06-26        浏览次数：132

  大鼠谷胱甘肽S转移酶P(GSTP1)ELISA KIT的应用

  大鼠谷胱甘肽S转移酶P(GSTP1)ELISA KIT用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)的含量。

  实验原理：

  试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。

  谷胱甘肽S-转移酶是谷胱甘肽结合反应的关键酶，催化谷胱甘肽结合反应的起始步骤，主要存在于胞液中。

  操作步骤：

  1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

  2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

  3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

  4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

  5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液(350μL)，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

  6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

  7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

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