Elisa 标准曲线相关问题及解答

    酶联免疫吸附实验(ELISA)可用于检测大分子抗原和特异性抗体等，具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点，广泛应用于生物医学实验中。很多因素都能影响标准曲线的结果，其中就包括配制和操作。

我是否可以改变标准品的配制？
◆ 不可以。用的稀释液适当稀释的重组标准品如说明书中所示。
◆ 混合和溶解标准品时，应避免起泡。
◆ 溶解后的标准品zui好静置至少15分钟（根据说明书）。在使用之前轻轻混匀，保证所有的固体已经溶解。
◆ 制作标准曲线时，确保所有的稀释步骤已经准确完成。稀释时注意及时geng换枪头。在移液之前将稀释液充分混合。

洗涤方式怎样影响我的标准曲线？
◆ 不完全的洗涤会降低测定性，导致不理想的标准曲线结果。确保洗板机的正常工作，确保酶标板各孔被充分洗涤却不干燥。

移液方式怎样影响我的标准曲线？
◆ 不合理的移液操作会导致高CV值和不理想曲线。
◆ 在制作标准曲线的过程中，不正确的移液方式会导致错误的稀释，从而使错误的数值进入标准曲线中，或者产生非线性曲线。确保移液器正常工作。每孔中的液体体积不等可能就是移液器失灵或者枪头使用不当所致。

测定多个酶标板时是否可以使用同一条标准曲线？
◆ 在测定不同板中的样品时，每一个板都对应一条标准曲线。技术错误或者不同的孵育情况，环境条件都会引起酶标板之间产生不同结果。一条标准曲线测定的样品值必需是在相同环境下产生的，否则就是无效值。