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工业检支原体与科研检支原体的区别?

发布时间2021-05-06        浏览次数:403

工业包括生物药生产、CAR-T、干细胞治疗、疫苗生产等,需要对主细胞库、病毒收获液、体外扩增的细胞等进行支原体检查。该检查的方法依据中国药典。科研检支原体则需要保证细胞中没有支原体污染,没有详细的方法规定。那么,工业和科研检支原体还有哪些区别呢?

1. 方法上:

工业可使用培养法、指示细胞培养法和NAT法(核酸扩增技术)。NAT法蕞常见的就是PCR和荧光定量PCR。只限定了这三种。NAT在方法验证后,可以替代前面两种方法。它尤其适合CAR-T等的放行检测。

科研则可采用各种方法,但一般不采用培养法,因为太慢。科研检支原体常见方法有PCR法、qPCR法、酶荧光法、恒温扩增法、DNA染色法、细胞感应法等。

2. 用途上:

工业检支原体用于过程控制、放行检测。生产前和生产后的成品都需要检。

科研检支原体是避免支原体污染细胞,干扰实验,一般是一周就要监测一次。

3. 支原体污染程度:

工业上支原体污染风险主要是存在于细胞和成品中。但环境也需注意,需要定期清洁。

科研上支原体污染风险主要是存在于细胞中,但环境也需注意,需要定期清洁。

工业上,支原体在细胞和成品中如果发生污染,也是含量较低,因而需要方法的灵敏度高,通常要求检测限达到10CFU/ml。

科研上,支原体如果污染细胞上清,则因为培养液中含有血清,因而繁殖较快,支原体的污染程度较高,通常每ml能达到10的3次方。因而对方法的灵敏度要求不高,而geng看重方便。

目前,市面上大量存在各种品牌的支原体检测产品,以NAT(PCR或qPCR)方法而论,科研和工业领域可考虑德国Minerva Biolabs产品,因其产品大多为冻干粉型,稳定性好,4度即可保存。而且操作较为方便,例如对于科研来说,PCR有预分装型,不用自己再分液,扩增后直接上胶。geng重要的是试剂盒灵敏度高,覆盖支原体物种广(100多种)。对于工业来说,qEP和Classic试剂盒还经过全面的方法验证,适合放行检测