上海远慕生物详细介绍蓝色琼脂糖凝胶6FF实验操作步骤,适用范围,用途等说明!
中文名:蓝色琼脂糖凝胶6FF
英文名:Blue Sepharose 6FF
供应商:上海远慕
规格:25ml,100ml
基质:6% 交联琼脂糖凝胶
配基:蓝色染料
配基密度:10μmol/mL
颗粒大小:45-165μm
大流速:300cm/h
工作PH:3-10
清洗PH:2-13
操作温度:室温
保存条件:保存于20%的乙醇于+4-8°C
存储条件:常温,阴凉
用途:生化研究。纯化各种需要NAD、NADP作为辅酶的的酶类、白蛋白、凝血因子、干扰素等。
保存温度:2~8℃
性状:蓝色液体,底部为胶体
蓝色琼脂糖凝胶6FF适用范围:
蓝色琼脂糖凝胶适用可适用于白蛋白、干扰素、α2巨球蛋白、凝血因子及各种需要NAD和NADP的酶的分离纯化。
蓝色琼脂糖凝胶6FF实验操作步骤:
1.蓝色琼脂糖凝胶6FF装柱,1.6×20cm,柱床体积为15ml;
2.用缓冲液1平衡5-10个床体积,流速为4ml/min;
3.含牛血清白蛋白的样品离心,用缓冲液1进行1:1稀释,0.45μm滤膜过滤,上样。流速为2ml/min;
4.用缓冲液1再洗5-10个床体积,流速为2ml/min;
5.用缓冲液2洗脱,流速为2ml/min,收集洗脱峰;
6.用纯水流洗5个柱床体积,再用20%的乙醇流洗5个柱床体积,流速为4ml/min,柱子置于4~8℃环境中保存;
7.将分离纯化的BSA进行SDS-PAGE电泳分析。缓冲液组成: 缓冲液1:50mMKH2 PO4 ,pH7.0。缓冲液2:50mMKH2 PO4 ,1.5MKCl,pH7.0。
蓝色琼脂糖凝胶6FF实验操作步骤注意事项:
1.该凝胶从冷室或冰箱中取出后好在室温下缓慢振摇恢复到室温,然后再装柱,以免产生气泡影响柱效。
2.次使用得先用20%的乙醇洗5个柱床体积,然后再用2MNaCl洗5个柱床体积,洗去残留的染料,再平衡使用。
3.上样样品必须与缓冲液1的pH、电导相同。
4.蓝色琼脂糖凝胶FF亲和填料的再生处理方法:用0.5MNaOH含2MNaCl流洗3个床体积,后用20%乙醇洗3个床体积即可。
5.该亲和填料保存条件为20%乙醇,4~8℃。