【古朵生物】ELISA方法的基本用途及操作程

发布时间2023-02-07        浏览次数：172

  【古朵生物】ELISA方法的基本用途及操作程序

  1、直接ELISA试剂盒

  本法首要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎(DVH)抗体的ELISA为例，直接ELISA的操作程序如下：

  (1) 资料

  ① 包被液、洗刷液、保温液、底物液、停止液;

  ② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参阅血清;待检鸭血清;

  ③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。

  (2) 方法过程

  ① 加抗原包被 → 4℃过夜，洗刷三次、抛干

  ② 加待检血清 → 37℃ 2小时，洗刷三次、抛干

  ③ 加酶标抗体 → 37℃ 2小时，洗刷三次、抛干

  ④ 加底物液 → 37℃ 30分钟，加停止液

  ⑤ 用ELISA检测仪测定OD值，并计算出P/N比值。

  (3) 成果判定 已知阳性血清与已知阴性血清的比值(P/N)≥2.1，并且已知阳性血清的OD值≥0.4;在上述条件建立的情况下，如果待检血清与已知阴性血清的比值(P/N)≥2.1，并且待检血清的OD值≥0.4，则判为阳性，不然判为阴性。

  2、双抗体夹心ELISA试剂盒

  本法首要用于检测大分子抗原。现以检测鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的双夹心抗体ELISA为例介绍本法的操作程序。

  ① 加抗体包被 → 4℃过夜，洗刷三次、抛干

  ② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟，洗刷三次、抛干

  ③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟，洗刷三次、抛干

  ④ 加底物液 → 37℃ 15分钟，加停止液

  ⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。

  3、双夹心ELISA试剂盒

  此法与双抗体夹心ELISA的首要差异在于：它是采用酶标抗抗体查看多种大分子抗原，它不只不用符号每一种抗体，还可进步试验的敏感性。

  此法的根本程序为：

  ① 加抗体(Ab-1)包被 → 4℃过夜，洗刷三次、抛干

  ② 加待检抗原(Ag) → 37℃ 60分钟，洗刷三次、抛干

  ③ 加用非同种动物出产的特异性抗体(Ab-2)→ 37℃ 60分钟，洗刷三次、抛干

  ④ 加入酶标抗Ab-2抗体(AB-3)→ 37℃ 60分钟，洗刷三次、抛干

  ⑤ 加底物液 → 37℃ 20分钟，加停止液

  ⑥ 用ELISA检测仪测定OD值。

  ELISA试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。