必知干货| HE染色石蜡切片的制作的七个步骤

发布时间2023-02-16        浏览次数：218

必知干货| HE染色石蜡切片的制作的七个步骤 　　设备用具：切片机、恒温箱、溶蜡箱、玻璃缸、载玻片、盖玻片、手术刀片、镊子、包埋盒。 　　试 剂 ：10%福尔马林、酒精、二甲-苯、固体石蜡、苏木-精、酸水、氨-水、酒精伊红染色剂型、加拿大树胶 　　(二)HE染色石蜡切片的制作过程 　　步骤一：取材与固定： 　　取动物新鲜组织块(一般厚度不超过0.5厘米)投入预先配好的固定液中(10%福尔马林，Bouin氏固定液)使组织、细胞的蛋白质变性凝固，以防止细胞死后的自溶或细菌的分解，从而保持细胞本来的形态结构。 　　步骤二：脱水透明： 　　一般用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂，逐渐脱去组织块中的水份。再将组织块置于既溶于酒精，又溶于石蜡的透明剂二甲-苯中透明，以二甲-苯替换出组织块的中酒精，才能浸蜡包埋。 　　步骤三：浸蜡包埋： 　　将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中，放入溶蜡箱保温。待石蜡完全浸入组织块后进行包埋：先制备好容器(如折叠一小纸盒)，倒入已溶化的石蜡，迅速夹取已浸透石蜡的组织块放入其中。冷却凝固成块即成。包埋好的组织块变硬，才能在切片机上切成很薄的切片。 　　步骤四：切片与贴片： 　　将包埋好的蜡块固定于切片机上，切成薄片，一般为5—8微米厚。切下的薄片往往皱折，要放到加热的水中烫平，再贴到载玻片上，放45℃恒温箱中烘干。 　　步骤五：脱蜡 　　常用HE染色，以增加组织细胞结构各部分的色彩差异，利于观察。苏木-精(Hematoxylin，H)是一种碱性染料，可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色，被碱性染料染色的结构具有嗜碱性。伊红(Eosin，E)是一种酸性染料，能将细胞质染成红色或淡红色，被酸性染料染色的结构具有嗜酸性。染色前，须用二甲-苯脱去切片中的石蜡，再经由高浓度到低浓度酒精，蕞后入蒸馏水，就可染色。 　　步骤六：染色　　 HE染色过程是： 　　①将已入蒸馏水后的切片放入苏木-精水溶液中染色数分钟。 　　②酸水及氨-水中分色，各数秒钟。 　　③流水冲洗1小时后入蒸馏水片刻。 　　④入70%和90%酒精中脱水各10分钟。 　　⑤入酒精伊红染色液染色2—3分钟。 　　步骤七：脱水透明： 　　染色后的切片经纯酒精脱水，再经二甲-苯使切片透明。 　　步骤八：封固： 　　将已透明的切片滴上加拿大树胶，盖上盖玻片封固。待树胶略干后，贴上标笺，切片标本就可使用。 　　HE染色石蜡切片 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针