古朵生物：PBS和D-PBS缓冲溶液怎么配制?

发布时间2023-02-22        浏览次数：221

  古朵生物：PBS和D-PBS缓冲溶液怎么配制?

  磷酸盐缓冲液(简称PBS)的是生物化学中常用的一种阻碍溶液pH变化的缓冲溶液，这种由盐溶液中含有氯化钠，磷酸盐，磷酸盐，氯化钾和磷酸钾组成。组份浓度：137 mM 氯化钠，2.7 mM 氯化钾，10 mM 磷酸二氢钠，2 mM 磷酸二氢钾。本文总结了PBS和D-PBS溶液的配制方法。

  1. 常规PBS磷酸盐缓冲液

  组成成份：

  磷酸二氢钾 34 g

  1 mol/L氢氧化钠溶液 175 ml

  蒸馏水 825 ml

  PH 7.2

  配制：

  先将磷酸盐溶解于500 mL蒸馏水中，用1 mol/L氢氧化钠溶液校正pH后，再用蒸馏水稀释至1000 mL。

  稀释液：

  取储存液1.25 mL，用蒸馏水稀释至1000 mL。分装每瓶100 mL或每管10 mL，121 ℃高压灭菌15 min。

  用途：主要用于一些化学实验中不影响实验反应的情况下调节pH值，以便让实验的化学反应在佳条件下进行。部分用于食品或是饲料行业加工，如食品或者饲料真菌毒素检验中Elisa方法的洗板应用或者食品微生物检验中的稀释缓冲液。

  2. PBS Buffer的配制具体步骤

  组份浓度：

  137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4

  配制量：1 L

  配制方法：

  (1)称量下列试剂，置于1 L烧杯中。

  NaCl 8 g

  KCl 0.2 g

  Na2HPO4 1.42 g

  KH2PO4 0.27 g

  (2)向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

  (3)滴加浓盐酸将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1 L。

  (4)高温高压灭菌后，室温保存。

  注意：

  上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。

  3. D-PBS是杜氏磷酸缓冲液

  全称为：Dulbecco's Phosphate Buffered Saline

  组分 分子量 浓度 (gm/L) 摩尔浓度 (mM)

  氯化钾 (KCl) 75 0.20 2.67

  磷酸二氢钾 (KH2PO4) 136 0.20 1.47

  氯化钠 (NaCl) 58 8.00 138.00

  磷酸氢二钠 (Na2HPO4) 142 1.15 8.10

  pH值为7.4。

  (1)杜氏磷酸盐缓冲液(Dulbecco's Phosphate Buffered Saline，D-PBS)也是一种磷酸盐缓冲液，与常规PBS的不同之处在于磷酸盐的含量稍低些，并含有钙镁离子。D-PBS主要用于胚胎学方面的研究，多用于胚胎的冲洗液、冻存液和培养液。

  (2)D-PBS配方：氯化钠8 g，氯化钾0.2 g，磷酸氢二钠1.15 g，磷酸二氢钾0.2 g，氯化钙0.1 g，含6个结晶水的氯化镁0.1 g溶于1 L ddH2O中。

  (3)以上配方为含有钙镁离子的D-PBS，如不加氯化钙和氯化镁，即为无钙镁的D-PBS。

  (4)在以上配方的基础上，还可以加入葡萄糖、丙酮酸钠等，以利于培养物的生长。

  D-PBS是杜氏磷酸缓冲液，也是一种磷酸盐缓冲液，与常规磷酸缓冲液大的不同点在于磷酸盐的含量稍低些，根据是否含钙镁分为两种即D-PBS w/钙 & 镁和D-PBS w/o 钙

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