古朵快讯：ELISA检测试剂盒的几种方法

发布时间2023-05-10        浏览次数：115

  古朵快讯：ELISA检测试剂盒的几种方法

  研究经验指出ELISA检测试剂盒可以用来检测血清样本，看有还是没有某个抗原或抗体，也可以看该抗原或抗体是多还是少，可以比较不同血清样本之间该抗原/抗体的含量高低。

  ELISA检测试剂盒样品收集:

  1. 血清：全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。

  2. 血浆：抗凝剂推荐使用EDTA.Na2，样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可检测。避免使用溶血，高血脂样品。

  3. 细胞培养上清：取细胞培养上清于1000×g离心20分钟，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。

  4. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果)，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样本对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

  5. 其它生物样品：1000×g离心20分钟，取上清即可检测.

  6. 样品应清澈透明，悬浮物应离心去除。

  7. 样品收集后若不及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃/-80℃冰箱内，避免反复冻融，1-6月内检测，4℃保存的应在1周内进行检测。

  8. 如果您的样本中检测物浓度高于标准品zui高值，请根据实际情况，做适当倍数稀释(建议先做预实验，以确定稀释倍数)。

  不同批次的ELISA检测试剂盒在 制作过程中很难保证质量*一致，即使是通过批批检的项目其检测结果也存在差异，因此必须选择和订购长批号的试剂，并保证保存条件。严格执行这一标准可以 避免因试剂批号改变而重新建立质控体系及重新评估试剂，并且能够保证结果的稳定性;对于效期短、使用率低的试剂，应当小量分装，每次使用则取分装部分即 可，避免反复冻融造成试剂的失效。

  ELISA测定模式包括以下几种：双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM抗体捕捉法、竞争抑制法，其中竞争抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作时差所引起的不公平竞争等因素的影响，结果重复性较差，质量较难控制。

  ELISA检测试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针。