ELISA实验要点：ELISA实验中缓冲溶液等试剂的配置

发布时间2023-06-08        浏览次数：177

  ELISA实验要点：ELISA实验中缓冲溶液等试剂的配置

  ELISA实验中是以抗原和抗体的免疫反应为基础，ELISA试剂以及各种溶液如何配置?近刚做了下ELISA实验，古朵生物技术小编把各种ELISA配置方法汇总如下：

  1、ELISA实验包被缓冲液

  2、ELISA实验洗涤缓冲液

  3、ELISA实验稀释液

  4、ELISA实验终止液

  5、ELISA底物缓冲液

  6、ELISA实验TMB四甲基联苯胺、使用液

  7、ELISA实验ABTS使用液

  8、ELISC

  试剂

  1、ELISA实验包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液)：

  NaHCO31.59g

  NaHCO32.93g

  加蒸馏水至1000ml

  2、ELISA实验洗涤缓冲液(PH7.4 PBS)：0.15M

  KH2PO4 0.2g

  Na2HPO4·12H2O2.9g

  NaCl 8g

  KCl0.2g

  Tween-20 0.05%0.5ml

  加蒸馏水至1000ml

  3、ELISA实验稀释液：

  牛血清白蛋白(BSA) 0.1g

  加洗涤缓冲液至100ml

  或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5～10%使用。

  4、ELISA实验终止液(2M H2SO4)：

  蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸98%、21.7ml。

  5、ELISA底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸)：

  0.2M Na2HPO4(28.4g/L) 25.7ml

  0.1M 柠檬酸(19.2g/L)24.3ml

  加蒸馏水50ml

  6、ELISA实验TMB(四甲基联苯胺)使用液：

  TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml

  底物缓冲液(PH5.5)10ml

  0.75%H2O2 32μl

  7、ELISA实验ABTS使用液：

  ABTS0.5mg

  底物缓冲液(PH5.5)1ml

  3%H2O22μl

  8、ELISA实验封闭液：

  牛血清白蛋白(BSA) 5g

  加洗涤缓冲液至100ml

  值得一提的是有的封闭液中含有脱脂奶粉，不适合长期保存。

  为了保证ELISA实验的准确性，实验操作中加入的缓冲液和各组分一定要，将洗涤液加入酶标板中的时候防止加入的试剂混入另外一个酶标孔，严防交叉污染。

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