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产品名称: | 48t/96t 人25羟基维生素D(25-OH-D)ELISA试剂盒 |
产品型号: | 48t/96t |
品牌: | 1495 |
产品数量: | |
产品单价: | 面议 |
日期: | 2023-11-21 |
48t/96t 人25羟基维生素D(25-OH-D)ELISA试剂盒的详细资料
人25羟基维生素D(25-OH-D)ELISA试剂盒说明书由上海古朵生物专业提供,本司详细介绍了ELISA试剂盒相关产品的操作使用说明书,品牌,价格,规格 ,操作步骤,注意事项等,专业代理出售不同ELISA试剂盒品牌的进品/国产ELISA试剂盒,为客户提供代测服务,ELISA种属涵盖有大鼠,小鼠,人,猴,鸡,猪,狗,牛及其他科研实验动物,了解更多种属请来电咨询!人25羟基维生素D(25-OH-D)ELISA试剂盒说明书 本试剂盒标本要求:
1.标本采集后尽早进行实验。血清、血浆可以直接检测
2.组织:按相关文献提取后,取上清液待测
3.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
4.可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
人25羟基维生素D(25-OH-D)ELISA试剂盒操纵步骤:
1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为(60μg/L ,40μg/L,20μg/L,10μg/L, 5μg/L)。
2.加样:分别设空缺孔(空缺对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操纵相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃往液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃往,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加进酶标试剂50μl,空缺孔除外。
7.温育:操纵同3。
8.洗涤:操纵同5。
9.显色:每孔先加进显色剂A50μl,再加进显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空缺空调零,450nm波长依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人25羟基维生素D(25-OH-D)ELISA检测试剂盒计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回回方程式,将样品的OD值代进方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
人25羟基维生素D(25-OH-D)ELISA Kit注意事项:
1.试剂盒从冷躲环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装进密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其正确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数目多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.严格按说明书的操纵进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准
6.底物请避光保存。
7.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
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