大鼠5羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒特点:
一、、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
大鼠5羟色胺(5-HT)
ELISA试剂盒体类标本:
包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1)血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5)组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
大鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒样本的处理方式:
1、胃液、唾液、尿液的采集方式一般现采现用,胃液、唾液的采集时间是空腹采集,一般隔夜尿不采集;
2、采集血清时,一般要加入总体积1%的抗凝剂,采集后先室温或4℃静置半小时后,800-1000rmpx5min分离,取上清,-20℃或4℃保存备用;
3、组织提取液、肺泡灌洗液等,采集后离心分离,800-1000rmpx5min,取上清,-20℃或4℃保存备用;
4、采集血浆时一般不加抗凝剂,采集后立即离心800-1000rmpx5min分离,取上清,-20℃或4℃保存备用;
5、不贴壁细胞(分泌性蛋白),将培养基和细胞转移至10ml离心管,500-800rmpx10min,吸取上清至另一10ml离心管中,10000rmpx10min,-20℃或4℃保存,作为标本进行检测,如有需要可进行透析或纯化处理。
大鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒内容及其配制:
1.试剂盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
2.96/48人份酶标板 1块板(96T) 半块板(48T) 即用型
3.塑料膜板盖 1块 半块 即用型
4.标准品:40umol/L 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按说明书进行稀稀
5.空白对照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
6.标准品稀释缓冲液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型
7.生物素标记的抗5-HT抗体 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
8.亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型
9.洗涤缓冲液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按说明书进行稀释
10.底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
11.底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
12.终止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
大鼠5羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒特点注意事项:
1.Elisa试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔一孔OD值的),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.严格按说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
6.本试剂不同批号组分不得混用。
7.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.底物请避光保存。
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