猪组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法:
1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
猪组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒代测操作步骤:
1.实验开始前,各试剂均应平衡至室温,试剂不能直接在37 溶解;试剂或样品配制时,均需充分混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
2.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液 100 ,余孔分别加标准品或待测样品100 ,注意不要有气泡,加样 时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37 温育2小时。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
3.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100 (临用前配制),酶标板加上覆膜,37 温育1小时。
4.弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约400 /每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
5.每孔加检测溶液B工作液(临用前配制)100 ,加上覆膜,37 温育1小时。
6.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。
7.每孔加底物溶液90 ,酶标板加上覆膜37 避光显色(反应时间控制在15-30分钟,当标准孔的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显时,即可终止)。
8.每孔加终止溶液50 ,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物 液的加入顺序相同。
9.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度( 值)。
猪组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒特点:
1.适用于血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
2.可检测动物类型丰富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、鸡、虾、鱼等。
3.可检测指标齐全:白介素,干扰素,肺炎衣原体,血管紧张素,炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等指标。
猪组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒代测注意事项:
1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
3.保用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物a、b液时,避免使用带金属部分的加样器。
4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水
6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
9.底物a应挥发,避免长时间打开盖子。底物b对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,实验完成后应立即读取od值。
猪组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒代测标签:
猪组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒
猪ELISA试剂盒 组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒