产品名称: |
48t/96t 人抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒 |
产品型号: |
48t/96t |
品牌: |
1495 |
产品数量: |
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产品单价: |
1.00 |
日期: |
2023-12-01 |
48t/96t 人抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒的详细资料
上海古朵生物科技详细为您介绍
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中文名:人抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA 试剂盒
英文简称:Human proliferating cell nuclear antigen antibody,PCNA ELISA Kit
规格:48T , 96T
存储条件: 频繁使用时(2-8摄氏度),较长时间储存时(-20摄氏度)
有效期:2-8摄氏度2周,-20摄氏度 存放6个月
使用范围:本产品仅科研实验,严禁用于临床使用
使用原理:
1,ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
2,结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
3,在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
4,用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。
5,此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
6,由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
人抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒价格 操作步骤:
1、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
2、温育:用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
3、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
4、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
6、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
7、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
8、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒价格 注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
人抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒价格 ELISA试剂盒问题解析:
1.试剂的选择:选择优良试剂大家都是知道的,但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻。
2.加样中可能遇到的问题:在做血清或是血浆用于检测试剂的时候,会碰到血清血浆不好分离的情况,这个时候的解决办法是先放在常温中1到2小时,然后在进行离心处理
3.洗板时容易造成误差: 因为洗板是人工洗的,所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的,这个时候带有主观色彩,所以多清洗几次,还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动
4.显色问题: 使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长,都有可能造成显色剂不显色。所以在进行显色反应的时候,要先查看显色剂本身的情况
5.终止反应:在加终止剂的时候由于倾倒速度快,差生气泡,造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒
6.读板:读板的时候先应该保证板的清洁干净