产品名称：	48t/96t 人谷氨酸脱氢酶(GDH)ELISA试剂盒
产品型号：	48t/96t
品牌：	1495
产品数量：
产品单价：	1.00
日期:	2023-11-21

48t/96t 人谷氨酸脱氢酶(GDH)ELISA试剂盒的详细资料

中文名：人谷氨酸脱氢酶(GDH)ELISA试剂盒
英文名： Human Glutamate dehydrogenase;GDH ELISA Kit
供应商：上海古朵
规格：96T/48T
保存条件：2-8℃低温保存
特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应。
保质期：六个月
应用领域：ELISA试剂盒等产品满足于生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学等生物实验需求，不用于临床诊断。



实验原理：GDH试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知GDH浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将GDH生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中GDH的活性浓度呈比例关系。



人谷氨酸脱氢酶(GDH)ELISA试剂盒操作步骤 技术原理：
(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
(2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。
(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。
(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重复性好。以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。


人谷氨酸脱氢酶(GDH)ELISA试剂盒操作步骤 操作时需注意：
1.不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同，务必按照所用人Opiorphin蛋白(OPI)ELISA试剂盒说明书严格操作，否则容易产生检测结果的不确定性.
2.若不同批号ELISA试剂盒的不同组分(A液或酶工作液)，或不同试剂的不同组分进行交叉使用，有可能出现显色浅或本底高，花板等情形。
3.反应时间的误差，做大量标本时，一孔和后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。
4.临界值附近标本波动为正常现象，任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。
5.加样时样品量误差，对于阴或很阳的标本影响不大，但对阈值附近的标本影响大，建议校对加样器。



样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。



人谷氨酸脱氢酶(GDH)ELISA试剂盒操作步骤 操作步骤:
1.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
2.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
3.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
4.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
5.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
6.温育：操作同3。
7.洗涤：操作同5。
8.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
9.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
10.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。



注意事项：
1．  试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．  浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．  各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．  请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．  底物请避光保存。
7．  严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．  所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．  本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。