产品名称: |
48T/96t 神经生长因子前体(proNGF)ELISA试剂盒 |
产品型号: |
48T/96t |
品牌: |
1495 |
产品数量: |
|
产品单价: |
1.00 |
日期: |
2023-11-21 |
48T/96t 神经生长因子前体(proNGF)ELISA试剂盒的详细资料
上海古朵生物科技详细为您介绍
神经生长因子前体(proNGF)ELISA试剂盒,用途,规格,保质期,价格,品牌等详情,ELISA种属有:大鼠ELISA检测试剂盒,小鼠ELISA检测试剂盒,
人ELISA试剂盒,马ELISA检测试剂盒,羊ELISA检测试剂盒,猴ELISA试剂盒,猪ELISA试剂盒,狗ELISA检测试剂盒,植物ELISA试剂盒,猴ELISA试剂盒,其他动试剂盒,欢迎来电订购!
中文名:神经生长因子前体(proNGF)ELISA 试剂盒
规格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6个月
样本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。
用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
运输方式:现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。
检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
神经生长因子前体(proNGF)ELISA试剂盒 操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
神经生长因子前体(proNGF)ELISA试剂盒 ELISA 试剂盒 17 个相关操作技巧如下:
1. 切记在加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
2. 合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
3. 在吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
4. 务必做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的度
5. 样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。
6. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
7. 未使用完的酶标板或者试剂,请于 2-8℃ 保存。辣根过氧化物酶标记抗人 IgG 工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人 IgG 工作液。
8. ELISA试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。
9. 剩余样品及废弃物应经 121℃ 高压蒸汽灭菌 30 分钟,或用 5.0g/L 次氯suan钠等消毒剂处理 30 分钟后废弃。
10. 人 ELISA 试剂盒洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
11. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是后加底物溶液及 2N H2SO4。测量时先用此孔调 OD 值至零。
12. 手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置 15~30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
13. 对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。
14. 没有去离子水或双蒸水时,可以使用娃哈哈纯净水配制溶液,切勿使用自来水。
15. 在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。
16. 吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡,人 ELISA 试剂盒吸取的量不够准确。
17. 吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸,减少误差。
订购说明:
1、大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。
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3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日价格为准。
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